长田教授为了使我的实验能够顺利进展，特意采购了一台LVSEM供实验使用。肾脏的形态学诊断无论是临床还是动物实验，常规使用的是TEM（透射电镜，）由于样本制备的复杂性以及受组织表面图像信息的限制，TEM在肾活检检测中的应用仍未得到广泛的探索。相比较而言，台式低真空扫描电子显微镜(LV-SEM)的优点在于：1，比光镜的放大倍数和分辨率高得多的特点，2，样本制作比较简单3，直接观察普通的光镜标本无需进一步制样处理，4，在肾小球基底膜上可以展示出三维立体平面，有助于明确诊断。日立台式扫描电镜体积小，操作方便，不受暗室要求，具有很高的实用性。这个机器的主要特点是：低真空特性，用背散射电子直接观察没有覆盖盖玻片的染色组织，得到了SEM图像。结合常规的PASM-HE染色方法，用铂进行重金属染色的方法—“铂蓝”染色法—我们使用这种方法能够有效地观察肾小球细胞成分。铂蓝具有细胞组织特异性和有效增强背散射电子信号的特点，便于LV-SEM观察石蜡包埋组织切片。在玻片上未染色的薄石蜡切片脱蜡后，用铂蓝溶液进行染色，结果在LV-SEM观察中清晰地显示了光镜标本的细胞结构。这样，铂蓝染色的图像可以清晰地显示细胞成分和其他成分，而钝化的图像可以清晰地显示银阳性的基底膜和其他成分。这些染色特征是互补的。通过连续切片PASM染色和platin-blue染色标本的石蜡包埋组织，结合两者的LV-SEM图像，可以对同一位置组织病变的超细结构图像进行严密的检测。
目前我所研究的Alport综合征非常典型的一个特点是肾小球基底膜的lamination征，这个也是确诊该病的最主要的依据，但该病肾小球基底膜异常是如何进展至肾小球硬化而最终导致尿毒症，基底膜的破坏与足细胞减少有无相关性，在肾小球毛细血管壁出现的纤维素样渗出究竟和肾小球硬化有无直接联系，目前世界上未有相关研究阐明该病的发生及进展的机制。
Alport综合征是一种遗传性疾病，构成基底膜的IV型胶原发生遗传异常，导致肾小球基底膜
变薄或变厚，或厚薄不均，临床上以持续血尿为特征，短期将进展至尿毒症。LV-SEM应用于经遗传检查、免疫染色、TEM证实的薄基膜病变的标本上，我们已经观察到整个肾小球基底膜上的小裂缝和气孔，表明它们与血尿及持续进展的肾功能下降有很强的相关性。
LV-SEM可有效观察肾活检的光镜标本和任何其他组织的染色选择。它的应用很可能扩展到常规透射电子显微镜无法进行组织检查，在常规光镜检查难以诊断的肿瘤以及许多需要超显微信息的情况下。随着LV-SEM的广泛应用，除了铂蓝染色和PASM银染色外，新的染色技术也将出扫描电镜原理透射电镜TEM扫描电子显微镜原子力显微镜偏光显微镜现，并将应用于细胞病理学诊断、快速分析以满足迫切需要这将是提高病理组织诊断准确性的重要贡献。
学术安排：2020年3月2日 日本东京 足细胞相关学术研讨 第一讲演者（日语）
2020年4月9-10日 日本肾脏学会 第一讲演者（英语）
2020年9月10-11日 日本东部学术大会 第一讲演者（未定）
学会：日本肾脏病学术委员会委员 任期5年
论文：目前实验数据整理和完善中，拟下旬开始撰写论文。
拟5月份投稿
来日本已经完成了半年的研究及学习，总体来讲很顺利，与本人平日不懈努力及导师的耐心指导有关，我会继续努力，在有限的学习时间争取最大的成绩，感谢卫计委领导及医院赋予的信任与支持，唯有努力！
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